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首页 > 培训课程 > 生物/医学培训 > 基因编辑技术与动物模型构建研讨会9月班 更新时间:2022-07-28T10:52:31

基因编辑技术与动物模型构建研讨会9月班
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基因编辑技术与动物模型构建研讨会9月班

课程时间: 2022-09-03 09:00至 2022-09-04 18:00结束

课程地点: 线上活动 

主办单位: 上海循掘生物科技中心

门票名称单价截止时间数量
会务费 暂无说明 ¥2800.0 2022-09-02 17:00

会议介绍

会议内容 主办方介绍


基因编辑技术与动物模型构建研讨会9月班

基因编辑技术与动物模型构建研讨会9月班宣传图

基因编辑技术与动物模型构建研讨会

202293-4 腾讯会议网络会议室

网络学习班背景

CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期选择压力中形成的一种适应性免疫防御,可用来有效抵御病毒及外源DNA的入侵。CRISPR的Type II已经被广泛用于基因工程,它包含Cas9,crRNA和tracrRNA,其中crRNA含有能够识别20bp的靶向互补序列。Cas9,crRNA和tracrRNA组成复合体,识别并结合crRNA互补的序列,然后解开DNA双链,Cas9中的HNH活性位点剪切crRNA的互补DNA链,RuvC活性位点剪切非互补链,最终导致DNA的双链断裂(DSB),进而实现基因的敲除和插入。

目前,CRISPR/Cas9系统已经广泛用于对哺乳动物细胞,细菌,斑马鱼,小鼠,猪,猴的基因编辑。本学习班将详细讲解CRISPR/Cas9基因编辑工具原理,操作流程,理论结合实践,将让大家详细了解到具体如何利用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰动物等。学习班将为相关科研工作人员和兴趣爱好者提供了很好的培训资源。


【讲师背景】

李博士,副研究员。2014年博士毕业于德国慕尼黑工业大学大型动物生物技术研究所, 获极优等荣誉学位(MAGNA CUM LAUDE)。主要研究领域为基因编辑动物模型构建与应用研究,成功构建过ROSA26基因定点敲入大动物模型、Kras基因点突变大动物模型、小鼠基因编辑肝癌模型等,在基因编辑研究领域积累了较好的研究知识背景,擅长对该领域知识讲解和传授,讲解深入浅出、逻辑性强,并可针对性对基因编辑实际操作问题进行解答与启发,以期更好地让基因编辑工具应用于您的工作和学习研究中。目前已发表论文22篇,其中第一作者/并列通讯作者SCI论文12篇,以第一发明人申请国家发明专利2项。主持完成国家自然科学基金等项目6项,获得上海市实验动物学会2020年度学会工作先进个人、2019年 “ICLAS-CALAS国际青年奖”、2018年第三十届上海市优秀发明选拔赛银奖、2017年上海市人才发展资金等。


【预期目标】
1掌握基因打靶与基因编辑技术(ZNF,TALENs,CRISPR/Cas9),能够设计sgRNA靶点,构建CRISPR/Cas9质粒,用于基因敲除和敲入。
2掌握CRISPR/Cas9质粒转染方法, 阳性细胞克隆筛选方法体系,基因编辑细胞系的建立,基因修饰情况分析方法。
3掌握CRISPR/Cas9脱靶产生的原因,脱靶检测方法,降低脱靶问题的方法
4掌握CRISPR/Cas9的实际应用,构建动物模型,对构建基因修饰小鼠和基因修饰大动物(猪)有较深入了解。
5掌握新基因编辑工具,如:Cpf1, C2C2, base editing等。
6掌握基因编辑研究领域前沿进展,基因编辑工具的拓展应用、临床应用等,形成利用基因编辑工具结合自己研究内容等科学思维。
7Base editor 使用方法。
8基因编辑工具用于检测新型冠状病毒、基因编辑工具有可能应用于新冠治疗等应用的介绍与拓展

【详细日程

基因编辑技术与动物模型构建研讨会日程

日期

时间

主题

详细内容

第一天上午

9:00-10:30

基因修饰技术简介

基因打靶与基因编辑技术(ZNF, TALENs,CRISPR/Cas9)介绍

基因编辑、基因修饰、基因打靶、转基因、基因敲除、基因敲入等专业领域概念梳理

CRISPR/Cas9结构和特点

如何使用CRISPR/Cas9系统对特定基因进行敲除或定点插入(详细方法步骤)



拓展如何提高定点敲入效率等知识

10:30-10:45

休息

10:45-12:00

基因修饰技术简介

基因编辑工具Cas12(Cpf1)、Cas13(C2C2)、Cas14的结构、特点、工作原理

如何使用Cas12(Cpf1)、Cas13(C2C2)、Cas14系统进行编辑

Cas12(Cpf1)、Cas13(C2C2)、Cas14与Cas9的比较

Cas9、Cas12(Cpf1)、Cas13(C2C2)、Cas14的应用和技术展望

上午现场答疑


12:00-13:30

午饭及午休

第一天下午

13:30-14:00

CRISPR(sgRNA)设计方法和相关网站介绍

sgRNA设计方法和相关网站介绍

CRISPR(sgRNA)的在线设计(在线互动设计演练)

14:00-15:30

基因编辑实验详细操作

gRNA oligos模板退火

退火gRNA与线性化CRISPR/Cas9载体连接

连接产物转化到大肠杆菌(DH5α),转化产物涂板培养,CRISPR/Cas9重组子细菌克隆挑取,扩大化培养,鉴定阳性克隆

细胞转染(Electroperation,Nuclefection,Nanofection,X-fection)等介绍与应用拓展

单细胞克隆筛选(有限稀释法,滤纸法、环法、流式分选法等)方法介绍与应用拓展

15:30-15:45



15:45-17:00

利用CRISPR/Cas9技术编辑动物细胞系

CRISPR/Cas9质粒细胞转染方法

阳性细胞克隆筛选,基因修饰基因组DNA模板快速制备

目的靶基因的基因组DNA片段的PCR扩增,电泳检测PCR产物

PCR产物退火变性,T7E1酶切,电泳鉴定基因修饰情况

17:00-17:30

CRISPR/Cas9关键点总结、归纳、拓展

基因编辑关键知识点归纳、总结和提炼

CRISPR/Cas9技术应用拓展(如CAB基因敲入方法等介绍)


第二天上午

9:00-10:30

利用基因编辑技术构建基因敲除或敲入小鼠

基因工程小鼠的详细分类与比较

小鼠受精卵分离和培养

CRISPR/Cas9系统显微注射到小鼠受精卵

受精卵显微注射后回输到代孕母鼠体内

PCR和T7E1分析和鉴定基因敲除小鼠(Founder)

基因敲除小鼠基因敲除情况分析

CRISPR/Cas9构建基因敲除小鼠详细实验流程归纳和总结

10:30-10:45

休息

10:45-11:15

利用基因编辑技术构建大动物模型

以大动物猪为例,进行详细介绍基因编辑技术在大动物模型中的应用

利用CRISPR/Cas9构建基因修饰大型动物(猪)流程

基因修饰大型动物优势

利用CRISPR/Cas9构建基因修饰大动物(猪)模型介绍

11:15-12:00

利用基因编辑技术构建动物模型的详细案例介绍

利用CRISPR/Cas9构建基因修饰小鼠方法与相关基因修饰小鼠模型

利用CRISPR/Cas9构建基因修饰大动物(猪、猴)方法与相关基因修饰大动物模型

拓展基因编辑技术在其它物种中的应用

拓展基因编辑技术在其它物种中的应用


12:00-13:30

午饭及午休

第二天下午

13:30-15:00

实验结果的点评与讨论

CRISPR/Cas9载体构建讨论

目的靶基因的基因组DNA片段的PCR扩增,电泳检测PCR产物结果讨论

PCR产物T7E1酶切,电泳鉴定基因修饰情况结果讨论

Sanger测序鉴定基因编辑结果CRISPR/Cas9质粒阳性转化子测序结果确认Sanger测序阅读基因编辑情况如何从测序色谱图中阅读靶向突变等位基因型

15:00-15:30

CRISPR/Cas9脱靶问题分析

脱靶产生的原因

脱靶检测方法

降低脱靶问题的方法

15:30-15:45


15:45-16:30

基因编辑领域进展大梳理与全面拓展

基因编辑技术的应用拓展介绍:SHERLOCK-V1、SHERLOCK-V2等应用于检测方面的拓展,Base editing

结合当下新型冠状病毒热点,基因编辑工具用于检测新型冠状病毒、基因编辑工具有可能应用于新冠治疗等应用的介绍与拓展

Cas系列突变体的介绍与应用

基因编辑的拓展应用(如应用于杜氏营养肌不良综合征、白内障、消灭蚊子、植物中的应用、细菌中的应用等)

基因编辑工具的伦理问题于讨论






收费标准

会务费用线上:2800/


会议时间:20229月3-4

会议地点线上:腾讯会议网络会议室

主办方:上海循掘生物科技中心

 

查看更多

上海循掘生物科技中心

上海循掘生物科技中心于2020年2月21日举办TCGA&GEO生信高通量数据挖掘分析研讨会2020(2月深圳班)会议。

会议日程


即将更新,敬请期待

会议嘉宾


即将更新,敬请期待

参会指南

会议门票


票种名称 价格 原价 票价说明
会务费 ¥2800 ¥

查看更多

温馨提示
酒店与住宿: 为防止极端情况下活动延期或取消,建议“异地客户”与活动家客服确认参会信息后,再安排出行与住宿。
退款规则: 活动各项资源需提前采购,购票后不支持退款,可以换人参加。

还有若干场即将举行的 基因编辑大会

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会议地点

部分参会单位

主办方没有公开参会单位
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